La fecondazione assistita in vitro è ora la scelta assoluta in tutti i casi di infertilità, in cui non sono stati risolti altri metodi più semplici di riproduzione assistita.

Indicazioni per FIVET,  fecondazione in vitro

Fattore maschile

• Disturbi dei parametri dello sperma

Fattore femminile

• Problema di tromba
• Disturbi dell’ovulazione
• endometriosi
• Infertilità inspiegabile

Controllo preliminare delle coppie

Prima di iniziare un tentativo di fecondazione in vitro, la coppia deve eseguire i seguenti test:

Per la donna:

• • Anti-TPO, anti-TG
  • AMH: ormone antimilleriano (indicatore della competenza ovarica nei livelli ovarici e valutazione dell’efficacia della stimolazione dell’ormone ovarico)
  • Controllo ormonale della riproduzione e della tiroide (FSH, LH, E2, Prolattina, TSH, PRG, Testo, DHEA-S, T3, T4,
  •  HSG
  • Ultrasuoni ginecologici (valutazione dell’anatomia uterina e ovarica)
  • Test di trasferimento dell’embrione. (In caso di canale cervicale stretto o deformato, si consiglia la dilatazione cervicale)
  • Isteroscopia (se del caso)
  • Esami generali del sangue e delle urine
  • Gruppo sanguigno – Rhesus
  • Elettroforesi dell’emoglobina per escludere l’anemia mediterranea e altro
  • Malattie infettive (epatite B e C, HIV, sifilide)
  • Test di screening prenatale (micoplasma, clamidia, CMV, toxoplasma, herpes II, rosso)

Per l’uomo:

• Sperma e cultura dello sperma
• Esami del sangue generali
• Gruppo sanguigno – Rhesus
• Elettroforesi dell’emoglobina per escludere l’anemia mediterranea, ecc.,
• Malattie infettive (epatite B e C, HIV, sifilide)

In caso di azoospermia non ostruttiva o grave oligoastenospermia, con una conta degli spermatozoi inferiore a 5 milioni per ml, si raccomandano ulteriori test diagnostici:

• Screening per fibrosi cistica
• Screening per microarrays cromosoma Y.
• Cariotipo per escludere anomalie aritmetiche o strutturali dei cromosomi

Protocolli di stimolazione ovarica nella fecondazione in vitro 

• Ciclo naturale
• Stimolazione ovarica lieve – induzione dell’ovulazione
• Stimolazione ovarica controllata dell’ovulazione multipla
• Protocollo agonista lungo
• Breve protocollo della concorrenza
• IVM (maturazione in vitro)

Fasi di fecondazione in vitro:

• Stimolazione ormonale ovarica controllata
• Raccolta delle uova, elaborazione del campione di sperma
• Fecondazione delle uova
• Coltivazione di embrioni
• Trasferimento di embrioni intrauterini
• Crioconservazione degli embrioni

Stimolazione ormonale ovarica controllata per ovulazione multipla

Ogni donna, dalla nascita, ha già nelle sue ovaie il numero totale di uova che userà nella sua vita ed è circa 1 milione / ovaia. Questo numero sta gradualmente diminuendo e all’età delle mestruazioni inizia a raggiungere circa 450.000. Il numero di uova precoci che entrano nella fase di maturazione è di circa 1000 per ciclo. Alla fine, solo 1 o 2 di loro raggiungeranno l’ovulazione durante la fase di maturazione finale. Il resto diventerà follicoli pieni e sarà distrutto dal corpo.

Lo scopo della stimolazione controllata dell’ormone ovarico è quello di maturare più di una o due uova per ciclo. A tale scopo, è necessario somministrare ormoni gonadotropinici (FSH e LH) in combinazione con agonisti del GnRH (protocollo lungo) o antagonisti del GnRH (protocollo corto) iniettabili, sottocutanei o intramuscolari. Un fattore importante che influenza la “risposta” di un’ovaia al trattamento somministrato, ovvero il numero di uova che matureranno, è l’età della donna.

La stimolazione ormonale con l’uso di gonadotropine richiede solitamente 9-12 giorni per produrre molte uova mature. La somministrazione inizia dal 2 ° al 3 ° giorno del ciclo, dopo che la donna ha subito un esame ecografico e del sangue dell’endometrio e delle ovaie per escludere la presenza di cisti nelle ovaie. La dose di gonadotropine viene personalizzata giornalmente e ricontrollata ogni 3-4 giorni da esami ematologici ed ecografici delle ovaie e dell’utero per regolare la dose in base alla risposta delle ovaie e ai risultati del controllo. I follicoli, che hanno un diametro lordo maggiore di 18 mm, sono considerati maturi, per cui l’ormone corionico gonadotropina hCG viene somministrato per far maturare i follicoli,

Per prevenire la rottura follicolare precoce e la perdita di ovuli a causa della stimolazione ormonale, agonisti e antagonisti inibiscono la secrezione degli ormoni ipofisari (FSH, LH) e consentono ai follicoli ovarici di aumentare gradualmente. la loro maturazione senza il timore di fecondazione precoce e perdita di follicoli. La differenza è che gli agonisti del GnRH vengono somministrati quotidianamente dal 20 ° giorno del precedente ciclo di stimolazione e continuano fino alla somministrazione di hCG (protocollo lungo), mentre gli antagonisti del GnRH vengono somministrati 6 ° giorno dopo l’inizio della stimolazione con gC giorno di somministrazione di hCG (protocollo corto). I due protocolli sembrano avere lo stesso tasso di gravidanza per tentativo,

Aspirazione delle uova L’anestesia generale non è richiesta per l’aspirazione. L’anestesista fornisce anestesia lieve per via endovenosa (intossicazione) mentre il ginecologo prescrive un’analgesia locale con xilocaina nella regione cervicale. ago per ovulazione di 17G di diametro e che porta al follicolo attraverso la parete vaginale Con l’ago speciale il contenuto di aspirazione viene aspirato. Il liquido follicolare aspirato viene controllato direttamente dagli embriologi per trovare le uova.

La durata media di questa procedura è di circa 10-15 minuti, con la donna che viene trasferita nel suo letto dove rimane per circa un’ora per il riposo e l’osservazione. Di seguito è riportato un briefing dettagliato della coppia da parte del nostro personale appositamente addestrato al centro, sia sul numero e sulla qualità delle uova che hanno ricevuto, sia sul trattamento che la donna avrebbe seguito. Dopo essere stata informata, la coppia può partire per la propria casa.

Gli ovuli aspirati vengono collocati in speciali piastre nutritive in un forno speciale per coltura dove rimangono per 4-6 ore per completare i loro processi metabolici e prepararsi alla fecondazione.

Raccolta e trattamento dello sperma
Il campione di sperma raccolto durante la masturbazione nel giorno della deposizione delle uova in un’area di laboratorio appositamente progettata viene sottoposto a un trattamento speciale allo scopo di migliorare la concentrazione, la motilità degli spermatozoi e il rilascio di sostanze tossiche. Innanzitutto, il campione viene centrifugato e quindi classificato con la tecnica della densità (Percoll) per selezionare la migliore vitalità e motilità degli spermatozoi.

In alternativa, è possibile utilizzare un campione di sperma crioconservato del coniuge che è stato raccolto in un momento precedente (solo in casi speciali).

In caso di azoospermia, la biopsia testicolare viene eseguita mediante FNA (biopsia con ago sottile) o TESE (biopsia con tessuto aperto), sotto analgesia locale e anestesia lieve (intossicazione). Nel materiale bioptico viene ricercata la presenza di spermatozoi acerbi o maturi da utilizzare per fertilizzare le uova. Il nostro laboratorio è stato uno dei primi centri al mondo a utilizzare spermatozoi acerbi e ad ottenere la nascita del quarto bambino al mondo da parte dello sperma. Questi risultati sono stati pubblicati sulla rivista Human Reproduction.

Fecondazione
La tecnica di fecondazione applicata dipende dalle caratteristiche del campione di sperma (concentrazione, motilità, morfologia), dal numero di uova prelevate e dalla storia riproduttiva della coppia. Le due tecniche utilizzate sono la IVF classica e la microfiltrazione (ICSI).

Fertilizzazione IVF convenzionale
Questo metodo viene utilizzato quando i valori di tutti i parametri del seme (concentrazione, motilità, morfologia) sono a livelli normali. In questo metodo le uova vengono coltivate insieme a poche centinaia di migliaia di spermatozoi durante la notte.

Per ulteriori informazioni potete contattarmi alla mail : dott.nikosprapas@gmail.com e visita la pagina facebook